کیفیت میکروبیولوژیکی آب آشامیدنی اهمیت جدی برای سلامت عمومی دارد. برای ارزیابی کارایی دستگاه تصفیه آب خانگی برای در جهت حذف باکتری¬ها و به دلیل اهمیت کلینیکی باکتری سودوموناس آئروژینوزا، حضور این باکتری در فیلتر‏های دستگاه‏های تصفیه آب مورد بررسی قرار گرفت. برای این منظور، فیلترهای 50 سیستم غشایی آب خانگی مورد مطالعه قرار گرفتند.
روش‏های میکروبیولوژیکی و مولکولی برای شناسایی و تایید جدایه‏های سودوموناس آئروژینوزا انجام شد. حساسیت آنتی بیوتیکی جدایه‏ها با استفاده از روش استاندارد انتشار دیسک بررسی شد. آنتی بیوتیک‏های مورد استفاده شامل پیپراسیلین، تیکارسیلین، سیپروفلوکساسین، سفتازیدیم، سفپیم و ایمی پنم بود. روش انتشاری دیسک ترکیبی و روش هم افزایی دیسک دوگانه در جدایه‏ها مورد آزمون قرار گرفت. در نهایت از روش PCRبرای شناسایی ژن‏های تولید کننده آنزیم متالوبتالاکتاماز در سویه‏های تولید کننده متالوبتالاکتاماز استفاده شد.
از 50 فیلتر که مورد بررسی قرار گرفتند، 100 جدایه به عنوان سودوموناس آئروژینوزا شناسایی شدند. در برخی از دستگاه‏های تصفیه آب، باکتری‏های جدا شده از فیلترهای مختلف دارای مشخصات ژنتیکی مشابه یا نزدیک هستند. این به این معنی است که این جدایه‏ها احتمالا قادر به عبور از فیلتر و رسیدن به فیلترهای بالاتر از دستگاه می‏باشند. آزمایش فنوتیپی تولید MBL را در 7 (7٪) جدایه‏ها نشان داد. دو جدایه از نظر blaVIM-1 مثبت گزارش شد ، یک جدایه blaNDM و یک جدایه نیز blaIMP-1 رانشان داد. بالاترین سطح مقاومت در برابر تیکارسیلین 30 (30%) بود. یکی از جدایه‏های سودوموناس آئروژینوزا به تمام دیسک‏های ضد میکروبی مقاوم بود. ده جدایه (10%) نیز حداقل به سه کلاس آنتی بیوتیک مقاوم بودند و مقاومت آنها از نوع چندگانه بود.
گسترش وسیع فنوتیپ مقاومت باکتریایی در دستگاه¬های تصفیه آب نشان می¬دهد که مکانیسم¬های مقاومت، بین سویه¬های محیطی سودوموناس آئروژینوزا در گردش است و همچنین حضور ژن‏های تولید کننده MBL در این محیط¬ها منجر به نگرانی است. برای حل این مشکل حذف میکروارگانیسم‏ها از دستگاه‏ها و آنالیز دوره ای آب‏های تصفیه شده ضروری به نظر می‏رسد.

درمان های آزمایشگاهی برای عفونت استافیلوکوکوس توسط پنی سیلین منجر به مقاومت به پنی سیلین در سراسر جهان شد. سپس برای درمان عفونت های ناشی از استافیلوکوکوس آرئوس مقاوم به متی سیلین (MRSA) از آنتی بیوتیک ونکومایسین استفاده شد، در حقیقت درمان های آزمایشگاهی استافیلوکوکوس آرئوس  مقاوم به متی سیلین (MRSA) در جهان خیلی افزایش یافت. در سال 2002، نه سویه ی استافیلوکوکوس آرئوس مقاوم به متی سیلین (MRSA) که مقاوم به ونکومایسین (VRSA) نیز بودند در آمریکا گزارش شد. در این پژوهش به تحقیق در مورد مقاومت به ونکومایسین در میان استافیلوکوکوس های جدا شده در استان خوزستان پرداختیم. 100 نمونه MRSA از بیماران بخش عفونی بیمارستان های استان خوزستان جمع آوری شد و با استفاده از PCR حضور ژن های مقاوم به ونکومایسین( vanA, vanB, vanC, and vanD) مورد بررسی قرار گرفت. و همچنین مقاومت فنوتیپی این سویه ها توسط روش حداقل غلظت مهار کننده (MIC) مورد بررسی قرار گرفت.در میان این جدایه ها حضور ژن های ( vanD and vanC, vanB, vanA) به ترتیب1% ، 0%، 1% و 1% گزارش شد. و در بررسی (MIC) این جدایه ها یک نمونه با (MIC) شانزده میکروگرم بر میلی لیتر، یک نمونه با (MIC) هشت میکروگرم بر می، یک نمونه با (MIC) چهار میکروگرم بر میلی لیتر مشاهده شد. نتایج نشان می دهد که درصد ژن های مقاومت به ونکومایسین در استافیلوکوکوس آرئوس های مقاوم به متی سیلین در جنوب ایران افزایش یافته است.

 استافیلوکوکوس آرئوس مقاوم به متی¬سیلین از مهمترین مشکلات بهداشت جهانی محسوب می¬شود. باکتری گرم مثبت استافیلوکوکوس آرئوس از جمله مهمترین پاتوژن¬های انسانی است که سبب بیماری¬های پوستی و بافت¬های نرم می¬شود. باکتری استافیلوکوکوس آرئوس در مقابل سیستم ایمنی ذاتی انسان پروتئین¬های متعادل کننده ایمنی را در یک مجموعه فرار از ایمنی به نام-های استافیلوکیناز، انتروتوکسین استافیلوکوکوسی – P، انتروتوکسین استافیلوکوکوسی –A، پروتئین مهار کمپلمان و پروتئین مهار کموتاکسی تولید می¬کند.
این ژن¬ها بر روی باکتریوفاژهایی به¬ نام (β-haemolysin-converting bacteriophages (ΒC-ØS قرار دارند.90 درصد سویه¬های این باکتری یک نوع از باکتریوفاژهای حمل کننده مجموعه فرار از¬ ایمنی را دارند. این مطالعه جهت تعیین شیوع ژن¬های sak,scn,chp,sea,sep و همچنین تعیین الگوی مقاومت آنتی¬بیوتیکی و تیپ¬بندی این ¬ژن¬ها در استافیلوکوکوس آرئوس¬های جدا شده از بیماران بیمارستان¬های شهر اهواز انجام شد. در این مطالعه توصیفی، 155 جدایه استافیلوکوکوس آرئوس طی 9 ماه جمع¬آوری شد. که بیشترین مقاومت نسبت به پنی¬سیلین (97 %) بود و بعد از آن به ترتیب نسبت به متی¬سیلین (94%)، سفوکسیتین (5/93%)، سفتازیدیم (5/77%)، اریترومایسین (72%)، کلیندومایسین (62%)، سیپروفلوکساسین (60%)، ایمیپنم (55%)، جنتامایسین (54%) مشاهده شد. برای شناسایی میزان حضور ژن¬ها در جدایه¬های استافیلوکوکوس آرئوس از روش PCR استفاده شد. از 155 جدایه، ژن sak 94 مورد (61%)، ژن chp 44 مورد (28%)، ژنscn 60 مورد (39%)، ژن sea 54 مورد (35%)، ژن sep 5 مورد (2/3 درصد)، مثبت گزارش شد. در تیپ¬بندی مجموعه فرار از ایمنی 1/5% از جدایه¬ها در تیپA، 5/10% در تیپ B، 5/13% در تیپ C، 25/12% در تیپD، 28% در تیپ E، 3/1% در تیپ F ،65/0% در تیپ G و 5/15% از نمونه¬ها در هیچ تیپی قرار نگرفتند. در نهایت گوناگونی فراوان در IEC نشان¬دهنده این است که IEC یک DNA بسیار متحرک است. این امر کمک می¬کند که استافیلوکوکوس آرئوس با یک مکانیسم منحصر به فرد با بدن میزبان سازگار شود و یا با آن مقابله کند. شناسایی نقش این ساختار در حدت، شناخت ما را از توانایی¬های تکاملی استافیلوکوکوس بالا خواهد برد.

ویروس اسهال ویروسی گاوی (BVDV) یکی از پاتوژن های شایع بین جمعیت گاوها در کشورهای مختلف به شمار می رود که به واسطه تاثیرات نامطلوب بر باروری گاو خسارات اقتصادی فراوانی به همراه دارد. دستیابی به روشی سریع و قابل اعتماد در راستای تشخیص و کنترل بیماری ناشی از این ویروس امری حائز اهمیت است. در مطالعه حاضر با استفاده از پپتید نوکلئیک اسید (PNA) و نانو ذرات طلا اصلاح نشده و بر اساس رفتار نانو ذرات اصلاح نشده طلا در حضور PNA و RNA ویروسی، روشی سریع و بدون نیاز به نشانگر برای شناسایی RNA ویروس اسهال ویروسی گاوی طراحی شده است. ناحیه 5´UTR تعدادی از ویروس های BVDV-1 وBVDV-2 از بانک ژنی استخراج شد و بخش هایی از این توالی ها که بیش ترین شباهت را به یکدیگر داشتند جهت طراحی پراب PNA انتخاب شد. واکنش بر اساس غلظت های مختلف PNA، نانوذرات طلا و RNA انجام شد. توالی های PNA آزاد بدون بار در غیاب RNA مکمل، یون های سیترات پوشاننده نانوذرات را می پوشانند. بنابراین به دلیل نبود بارمنفی ذرات تجمع می یابند، اما زمانی که هیبریدیزاسیون PNA با RNA مکمل رخ دهد کمپلکس مولکولی باردار تشکیل می شود که این کمپلکس جذب نانو ذرات شده و بار منفی کافی برای حفظ پایداری نانوذرات طلا را فراهم می کند. حساسیت و ویژگی روش حاضر بررسی و با روش های RT-nested multiplex- PCR و Real-Time RT-PCR مقایسه شد. بر اساس نتایج رنگ سنجی حد شناسایی چشمی 48/10 نانوگرم بر میکرولیتر و براساس تغییرات طیفی، حد شناسایی 05/1 نانوگرم بر میکرولیتر بدست آمد. همچنین حدشناسایی میزان RNA ویروس با روش های Real-Time RT-PCR و RT-nested multiplex- PCR به ترتیب 5-10× 48/ 10 نانوگرم بر میکرولیتر و4-10×92/ 41 نانوگرم بر میکرولیتر به دست آمد. تغییرات رنگ سنجی در غلظت های مختلف RNA نمودار استانداردی با ضریب خطی 992/0= R2 به همراه داشت که نشاندهنده ارتباط مستقیم بین افزایش غلظت RNA در حضور غلظت ثابت PNA و میزان جذب نوری است. اگرچه دو روش Real-Time RT-PCR و RT-nested multiplex- PCR حساسیت بالاتری در شناسایی RNA ویروس داشتند ولی روش حاضر در عین سرعت، سادگی و کم هزینه بودن از حساسیت و ویژگی قابل قبولی برخوردار بود و در مواقع نیاز به سرعت عمل در تشخیص به عنوان گزینه ی مناسبی معرفی می گردد.

آب از نخستین نیازهای زندگی بشر است و یکی از موثرترین عوامل در چرخه مواد و انرژی در طبیعت می باشد که برای زندگی انسان و تمدن او نقش حیاتی دارد. کیفیت و سلامت آب آشامیدنی همواره یک موضوع مهم در سلامت عمومی است. تکنولوژی استفاده از فیلترهای تصفیه در سال¬های اخیر به علت آلودگی آب¬ها رواج یافته است. دستگاه تصفیه خانگی آلودگی¬هایی که سبب ایجاد طعم، بو، کدورت و اثرات نامطلوب می¬شود را کاهش می¬دهد. اما ایجاد بیوفولینگ، کیفیت فیلتر¬ها را کاهش می¬دهد. بیوفولینگ رشد میکروارگانیسم¬ها و تولید بیوفیلم میکروبی است. با تشکیل بیوفیلم امکان انتقال افقی ژن¬های مقاومت آنتی¬بیوتیکی در باکتری¬ها وجود دارد. با توجه به احتمال آلودگی میکروبی فیلترها، در این پروژه فیلترهای تصفیه خانگی شهر اهواز بررسی شد و در نهایت مقاومت آنتی¬بیوتیکی جدایه¬ها سنجش گردید.
بدین منظور از ۵۰ دستگاه تصفیه آب خانگی استفاده گردید. میزان معینی از هر فیلتر برداشته و در محیط نوترینت براث کشت داده شد. تعداد کلنی¬های هر فیلتر شمارش شد. باکتری¬ها به واسطه روش¬های افتراقی و بیوشیمیایی شناسایی شدند و مقاومت آنتی-بیوتیکی بوسیله روش دیسک دیفیوژن برای ۶ آنتی¬بیوتیک متدوال بررسی شد.
شمارش کلنی نشان داد که بین ۱۰۵ تا ۱۰۹ باکتری روی هر فیلتر وجود دارد. باکتری¬هایی شامل سودوموناس، باسیلوس، رودوکوکوس، آکروموباکتر و اسفینگوموناس شناسایی شد؛ تست آنتی¬بیوگرام نشان داد که جدایه¬ها اکثرا به چند دارو مقاوم هستند. بررسی پلی¬مورفیسم به روش تکثیر رندوم DNA ((RAPD نشان داد که باکتری¬های سودوموناس آئروژینوزا جدا شده الگوهای ژنوتیپی متفاوتی دارند در حالی که برخی باکتری¬های جدا شده از فیلترهای متفاوت الگوی مشابه داشتند.
بر اساس نتایج بدست آمده، فیلترهای دستگاه تصفیه خانگی یک محیط مناسب برای تولید بیوفیلم هستند. باکتری¬های مقاوم به چند دارو می¬توانند ژن¬های مقاومت آنتی¬بیوتیکی را از راه آب به باکتری¬ها و میکروفلور در بدن انتقال دهند. در این بررسی باکتری سودوموناس بیشترین جدایه بوده است و از اکثر فیلترهای دستگاه تصفیه جدا شد.
 

تب برفکی یک بیماری بسیارحاد و مسری است که توسط ویروس تب‌ برفکی در زوج سمان اهلی و وحشی ایجاد می¬شود. بیماری تب‌ برفکی از نظر خسارت‌های اقتصادی که به صنعت دامداری وارد می‌سازد ، حائز اهمیت است. در کشور ما نیز این بیماری مهمترین عامل تهدیدکننده‌ی سرمایه‌ و تولیدات دامی و اولین بیماری دامی در جدول مبارزه با بیماری‌های دام محسوب می‌گردد. گیاه خارشتر، گیاهی است علفی از تیره پروانه واران، و در طب سنتی کاربرد بسیار دارد، با توجه به خاصیت ترمیم بافت عصاره ی این گیاه و وجود گزارش هایی از خاصیت ضد میکروبی عصاره ی این گیاه ، این پژوهش با هدف ارزیابی اثر ضد ویروسی عصاره های اتانولی، متانولی و آبی- استیک اسید خارشتر، به کمک کشت سلول BHK( Baby Hamster Kidney ) صورت گرفت .گیاه جمع آوری و عصاره ها تهیه شد، سپس میزان غیر سمی عصاره ها با روش MTT-Assay مشخص گردید و غلظت کشنده برای نیمی از سلول ها (CC50)، تعیین گشت، سپس از غلظت غیر سمی رقت های متوالی تهیه شد و اثر ضد ویروسی آن ها در مراحل مختلف ویروس به روش رنگ سنجی MTT و کاهش پلاک بررسی شد . میزان غلظت مهاری میانه ( IC50) اندازه گیری شد و شاخص انتخاب با روش CC50 / IC50 بدست آمد . نتایج نشان داد، عصاره های آبی – استیک اسید و اتانولی در غلظت mg/ ml 3 / 0 و عصاره ی متانولی در غلظت mg/ ml3 و کمتر بر سلول ها اثر سمی ندارند . عصاره ها در مرحله ی ویروس کشی (اثر بر ویرویون آزاد) و در مرحله ی تیمار سلول ها با عصاره ها قبل از اضافه شدن ویروس، بیشترین اثر مهارکنندگی را داشتند؛ ولی در مرحله ی همزمان سلول با عفونت زایی و مرحله ی تیمار سلول با عصاره ها پس از اضافه شدن ویروس، کمترین اثر را داشته اند. عصاره ی اتانولی دارای عملکرد ضد ویروسی مطلوب تر است و عصاره ی متانولی سمیت کمتری برای سلول دارد. شاخص انتخاب بین 19/3 تا50/ 135 بدست آمد.

anellovirusهاویروس هایی با ژنوم DNA ،قطبیت منفی ، تک¬رشته¬ای و حلقوی می باشند و به عنوان عضوی از خانواده¬ی جدید Anelloviridae طبقه¬بندی می¬شوند. این خانواده دارای 9 جنس(از Alphatorquevirus تا Zetatorquevirus) می¬باشد که می تواند انسان¬ و حیوانات را آلوده کند.تاکنون مطالعات کمی در زمینه¬ی ویروس TTMDV/SAV وجود دارد.بسیاری از ویروس ها می توانند عامل عفونت در کبد بوده و موجب بروز هپاتیت شوند. هدف از این مطالعه بررسی حضورTTMDV در اهداکنندگان خون در شهر اهواز و ارتباط آن با ویروس هپاتیت B بود.60 نمونه سالم (از نظر عدم داشتن بیماری هپاتیت B) و 42 نمونه مبتلا به بیماری هپاتیت B از مرکز انتقال خون واقع در اهواز جمع¬آوری شدند.پس از استخراج DNA از سرم کیفیت ژنوم استخراج شده تعیین شد و به منظور بررسی حضور ویروس TTMDV در نمونه های سالم و آلوده به هپاتیت B، nested-PCR انجام شد. فراوانی نسبی ویروس TTMDV در افراد آلوده به هپاتیت B و افراد سالم به ترتیب 9/11% و 3/13% بود که این اختلاف از نظر آماری معنادار نمی باشد (05/0<P).آزمون مربع کای نشان داد که ارتباطی بین هپاتیت B و ویروس TTMDV وجود ندارد (05/0<P).فراوانی این ویروس در افراد مذکر 9/13% و در افراد مونث 10% می باشد. آزمون دقیق فیشر نشان داد این تفاوت از نظر آماری معنادار نمی باشد (05/0<P).رگرسیون لجستیک نشان داد که شانس آلودگی به ویروس TTMDV با افزایش سن کاهش می یابد (نسبت کاهش 98/0 و فاصله اطمینان 95% و 04/1-93/0).

 ویروس هپاتیت (HBV) B یکی از عوامل مهم هپاتیت حاد و مزمن بوده که می‌تواند حتی منجر به بروز، سیروز و کارسینومای‌ هپاتوسلولار گردد.پرسنل بهداشتی و دانشجویان پزشکی در مقایسه با سایر گروههای جامعه به دلیل مواجهه مکرر با بیماران و فرآورده های خونی و نیز ترشحات قسمت های مختلف بدن در ریسک بالاتر ابتلاء به بیماریهای عفونی از جمله هپاتیت B قرار دارند. این مطالعه مقطعی بر روی تعداد 130 نفر از پرسنل شبکه بهداشت و درمان شهرستان دشت آزادگان که واکسن نوترکیب هپاتیتB دریافت نموده بودند انجام شد. تعداد 5 10×5 سلول تک هسته ای خون محیطی(PBMC) بعداز جداسازی با فایکول در170میکرولیتر محیط کشت RPMI 1640حاوی پنی سیلین (U/ml 100 ) استروپتومایسین ( µg/ml100)و FBS(10%) به میکروپلیت¬های 96 خانه¬ای اضافه شد و جهت تحریک سلولها به محیط کشت حاوی PBMC 15میکرولیتر آنتی ژن ویروسی هپاتیت B (g/mlµ20) recombinant HBsAg (برای هر چاهک) اضافه شد. .سلولها درانکوباتور 5% CO2 به مدت 48ساعت در شرایط دمای 37درجه سانتیگراد درمجاورت آنتی ژن ویروسی انکوبه گردید.مایع رویی محیط کشت سلول با استفاده ازکیت الایزا جهت ترشح وتولید IFNγبا روش الایزا سنجیده می شد.نمونه ها از لحاظ سطح آنتی بادی ضد ویروس هپاتیت B به طریق الیزا بررسی شدند.یافته ها: نتایج حاکی از آن بود که 5/68٪پرسنل پاسخ ایمنی خوبو5/31٪ عدم پاسخ به واکسیناسیون داشتند.میزان اینترفرون گاما 35/46±14/47 بود بین تیترIFN-γو تیترanti-HBS افراد مور مطالعهارتباط مستقیم وجود دارد(653/0r=). بین میزان تیتر IFN-γ و تیترanti-HBS با شاخص توده بدنی،تعداد دوز واکسن ،فاصله زمانی آخرین تزریق واکسن ارتباط معنی داری وجود داشت )05/0P<).نتیجه گیری: نتایج این تحقیق نشان داد که 76/30٪ از افرادتحت مطالعه مصونیتی نسبت به دریافت واکسن هپاتیتB نداشتند.پیشنهاد می شود 5 سال پس از تزریق واکسن سطح HBs Ab در افراد در معرض خطر اندازه گیری و سپس در خصوص استفاده از دوز یادآور تصمیم گیری صورت گرفته و پیگیری شود

نام خانوادگی: حیدری نام: زهرا
شماره دانشجویی:9134203

عنوان پایان نامه: شناسایی ویروس اسهال ویروسی گاو با استفاده از نانو ذرات طلا
استاد راهنما: دکتر سیده الهام رضاتوفیقی
استاد مشاور: دکتر سعادت رستگارزاده
درجه تحصیلی: کارشناسی ارشد  رشته: زیست شناسی  گرایش: میکروبیولوژی
دانشگاه: شهید چمران اهواز  دانشکده: علوم  گروه: زیست شناسی
تاریخ فارغ التحصیلی: 5/11/1393 تعداد صفحه: 104
کلید واژه¬ها: ویروس اسهال ویروسی گاو، نانو ذرات طلا، RT-nested multiplex-PCR
چکیده: اسهال ویروسی گاو (BVD) یک عامل بیماری¬زا است که در گاوها ایجاد عفونت می¬کند و اهمیت اقتصادی در جهان دارد. این ویروس موجب خسارت¬های اقتصادی قابل توجه بر صنعت دام¬پروری می¬شود. در این پژوهش با کمک 3 روش متفاوت شناسایی ویروس با نانو ذرات طلا انجام گرفت و شرایط واکنش بهینه شد. این 3 روش شامل نانو ذرات اصلاح نشده، نانو ذرات اصلاح شده به کمک 2 پراب و تک پراب بود. در هر سه روش تغییر رنگ در نمونه های کنترل مثبت با چشم غیرمسلح قابل مشاهده بود. 50 نمونه خون از گاو¬های مشکوک به داشتن عفونت ویروس BVD جمع آوری شد و به طور موازی توسط هر دو روش نانو ذرات طلا و RT-nested multiplex PCR آزمایش شدند. در بین 20 نمونه مثبت اثبات شده با RT-nested multiplex PCR ، تعداد 18 نمونه در روش نانو ذرات اصلاح شده(2 پراب) ، 17 نمونه در روش نانو ذرات اصلاح شده(تک پراب) و 16 نمونه در روش نانو ذرات اصلاح نشده مثبت شدند. حساسیت و ویژگی¬ها روش نانو ذرات اصلاح شده (2 پراب)به ترتیب برابر 90% ،66/ 96% و روش نانو ذرات اصلاح شده(تک پرابه) 85% ، 90% و روش نانو ذرات اصلاح نشده برابر 80% و3/ 83% می-باشد. مقایسه دو روش نانو ذرات طلا و RT-nested multiplex PCR نشان داد که روش نانو ذرات طلا حساسیت کمترنسبت به RT-nested multiplex PCR دارد ولی روشی سریعتر، آسانتر و کم هزینه تر است.
 

ویروس اسهال ویروسی گاو (BVDV) پاتوژنی است که در نشخوارکنندگان ایجاد عفونت می‌کند و دارای اهمیت اقتصادی در سراسر جهان است. این ویروس ضررهای هنگفتی به صنعت دامداری وارد می‌کند. در این مطالعه، یک روش ساده جهت تشخیص RNA ویروس برمبنای رنگ‌سنجی و بر پایه واکنش‌های تکثیری متناوب و بدون نیاز به آنزیم، با کمک ساختارهای سنجاق‌سری پراب‌ها و بر پایه خاصیت کاتالیزوری RNA هدف، ارائه شده‌است. در این روش از 2 پراب (H1 و H2) با ساختمان سنجاق‌سری که در غیاب توالی هدف پایدار و فاقد توانایی هیبرید شدن هستند، استفاده می‌شد. در حضور توالی هدف، این توالی با هیبرید شدن با ساختار سنجاق‌سری H1، سبب باز شدن ساختار و فراهم شدن شرایط واکنش آن با H2 می‌شد. این واکنش به‌صورت زنجیره‌وار با هیبرید شدن ساختار گشوده شده H2 با H1، به عنوان مکملش، ادامه می‌یابد. در غیاب توالی هدف، انتهای چسبنده یا تک‌رشته‌ای (ssDNA)، سبب پایداری نانوذرات طلا و جلوگیری از مجتمع شدن آن‌ها بر اثر نمک موجود در محیط می‌شد. RNA هدف با پراب‌های سنجاق‌سری هیبرید شده و سبب شکل‌گیری پلیمر گسترده و 2 رشته‌ای DNA (dsDNA) از طریق HCR می‌شد. پلیمر dsDNA شکل گرفته، بدون توالی چسبنده تک‌رشته‌ای پایداری کمی برای نانوذرات ایجاد می‌کند و به این ترتیب افزایش غلظت نمک موجود در محیط سبب مجتمع شدن نانوذرات طلا و تغییر رنگ محیط واکنش از قرمز به آبی می‌شد. در این مطالعه 50 نمونه خون از گاوهای مشکوک، از نظر ابتلا به عفونت BVDV، جمع آوری و هم‌زمان با 2 روش HCR و nested multiplex RT-PCR مورد ارزیابی قرار گرفتند. حساسیت واکنش تا حدود TCID50 1/0 ویروس در هر واکنش تخمین زده شد. مقایسه نتایج nested multiplex RT-PCR با HCR نشان داد که روش جدید به کارگرفته شده برپایه HCR و نانوذرات طلا دارای حساسیت و اختصاصیت بالایی برای تشخیص در نمونه های کلینیکی است. این روش به دلیل سادگی و عدم نیاز به آنزیم، می تواند در طیف گسترده‌ای از برنامه‌های تشخیصی به‌کار گرفته شود.

بیماری تب برفکی یک بیماری حاد و شدیدا واگیردار است که توسط ویروس تب‌برفکی در نشخوارکنندگان اهلی و وحشی نظیر گاو، گوسفند، بز، گوزن و خوک ایجاد بیماری می¬شود. بیماری تب‌برفکی از نظر خسارت‌های اقتصادی که به صنعت دام وارد می‌سازد بسیار حائز اهمیت است. در کشور ما نیز این بیماری مهمترین عامل تهدیدکننده‌ی سرمایه‌ و تولیدات دامی و اولین بیماری دامی در جدول مبارزه با بیماری‌های دام محسوب می‌گردد. در این پژوهش اثر ضد ویروسی نانوذرات منیزیم، نقره و طلا بر ویروس تب برفکی در کشت سلول مورد بررسی قرار گرفت. برای تعیین غلظت غیر سمی نانوذرات از روش MTT assay و برای بررسی اثر ضدویروسی از روش plaque reduction assay استفاده شد. نانوذره¬ی منیزیم کمترین سمیت را برای سلول¬ها داشت و از غلظت 250 میکروگرم در میلی¬لیتر به پایین فاقد اثر سمی بود. نانو ذره¬ی طلا از غلظت 56/1 میکروگرم در میلی¬لیتر فاقد اثر سمی بود. نانو ذره¬ی نقره بیشترین سمیت را برای سلول¬ها داشت. به¬طوریکه در غلظت 62/15 نانوگرم در میلی¬لیتر فاقد اثر سمی بود. اثر ضد ویروسی نانوذرات بر مراحل مختلف رشد ویروس با کمک روش کاهش پلاک مورد بررسی قرار گرفت. در این میان نانوذره¬ی منیزیم توانایی مهار ویریون آزاد را داشت و هیچگونه اثری بر ویروس داخل سلول نداشت. نانوذره¬ی نقره بیشترین اثر را در مرحله¬ی جذب ویروس داشت و همانند منیزیم توانایی مهار ویروس داخل سلول را نداشت. نانوذره طلا برخلاف دو نانوذره¬ی دیگر توانایی مهار ویروس داخل سلول را داشت و پس از ورود ویروس به درون سلول از تکثیر آن جلوگیری می کرد. این پژوهش نشان دهنده تاثیرات متفاوت هر نانو ذره بر ویروس می باشد. از نانوذرات طلا می¬توان به عنوان حامل داروهای ضدویروسی استفاده کرد. نانوذرات منیزیم نیز به¬دلیل سمیت پایین کاندیدای مناسبی برای استفاده به¬عنوان عامل ضدویروسی هستند.